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哪一种体积排阻色谱柱最适合蛋白质及其多聚体的分离?

2011-10-28

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决定体积排阻色谱柱性能的3个重要因素
Three key factors attribute to high performance of SEC

 

1. 孔体积 = 更大的孔体积意味着更高的分离容量和高分辨率。
2. 表面涂层 = 消除非特异性次级相互作用。
3. 粒径 = 分辨率(达到sub-2μm性能)。

在筛选体积排阻色谱柱的时候,需要将以上3个因素都考虑进去。

 1. 孔体积优势: Sepax 5µm 150Å vs. Vendor T 5µm 125Å
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 2. 表面涂层优势: Sepax vs. TSK

带正电蛋白质在Zenix SEC柱上的洗脱

Flow rate: 0.35 mL/min; UV 214 nm
Temperature: Ambient

Sample: Lysozyme, pI=11
Injection: 5 μL (1.0 mg/mL)

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 3. 粒径优势: Sepax 3μm vs. 5μm

分离度差异 – 3μm vs. 5μm SEC

 
 

 

Columns: SRT 5μm, Zenix 3μm, 7.8x300mm
Mobile phase: 150mM Phosphate buffer, pH 7
Flow rate: 1 mL/min
Temperature: Ambient
Detection: UV 214 nm
Sample: BSA (5mg/ml)
Injection: 10 μL

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不同粒径下的SEC柱效比较

 
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 Column: Zenix 300 and SRT 300
Mobile phase: 150 mM Sodium phosphate, pH 7
Flow rate: 1.0 mL/min for 7.8x300 mm
0.35 mL/min for 4.6x300 mm
Temperature: Ambient (~23° C)
Detection: UV 214nm
Injection: 10 μL (3 μL for 4.6x300 mm)


Peak Protein Zenix 300
(4.6x300)
Zenix 300
(7.8x300)
SRT 300
(7.8x300)
1 Thyroglobulin 2180 1730 1120
2 BSA Dimer 4390 4600 2720
3 BSA 10280 13090 6590
4 Ribonuclease A 16490 22000 11160
5 Uracil 33640 38500 27860
 

 
Sepax体积排阻色谱柱的独特优势
Sepax SEC unique benefits

 1. 3 μm Zenix提供最高的分辨率,可用到普通HPLC和UHPLC上。
 2. 良好的批间重现性
 3. 对大部分蛋白质的分离无干扰 – 表面覆膜不产生次级相互作用的优势。
 4. 3 min的MAb快速诊断,以2 mL/min的流速将MAb多聚体从单体中分离出来。
 5. 更长的寿命: 高达300针。
 6. 在pH高达8.5下仍保持高度稳定, 与有机溶剂完全兼容。
 7. SRT-C/Zenix-C (用于疏水性样品)
 8. 根据您的样品分子量有100, 150, 300, 500, 1000, 2000 A等孔径可供选择。
 9. 专有的生产工艺下所生产的填料,在光散射检测中,检测到极低甚至无微小颗粒脱离现象。
 10. 极具竞争力的价格。
 赛分科技简介  

  赛分科技有限公司(Sepax Technologies, Inc)总部位于美国特拉华州高新技术开发区,致力于开发和生产化学药物与生物大分子分离和纯化领域的技术和产品。公司主要产品为液相色谱柱、固相萃取柱(SPE)及装置、色谱填料,以及分离纯化仪器设备等。目前,公司已开发出100多种不同型号的液相色谱材料,涵盖了广泛使用的反相(RP)、正相(NP)、超临界(SFC)、手性(Chiral)、离子交换(IEC)、体积排阻(SEC)、亲水作用(HILIC)、亲和(AF)、疏水(HIC)等,为世界范围内液相色谱产品最为完善的企业之一。
赛分的创新科技使之生产出最高分辨率及最高效的生物分离产品,包括体积排除、离子交换、抗体分离、和糖类化合物分离色谱填料和色谱柱,以及应用于DNA 测序和蛋白质分离的新型毛细管柱, 等。赛分科技先进的技术和完善的产品线已使赛分成为全球生物分离的领航者。

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