1. 样品的制备和提取
动物肝组织：
称取（5±0.05）g 动物肝组织样品于带盖的聚四氟乙烯离心管中，加入15 mL乙酸乙酯，再加入3 mL 10.0%碳酸钠溶液，以10,000 r/min以上的速度匀质60 s，盖上盖子以 5000 r/min 的速度离心2 min，吸取上层有机溶剂于离心管中，在残渣中再加入10 mL 乙酸乙酯在漩涡混合器上混合1 min。离心后吸取有机溶剂并合并提取液。在收集的有机溶剂中加入5 mL 0.10 mol/mL 的盐酸溶液，漩涡混合 30 s，以5000 r/min 的速度离心2 min，吸取下层溶液，同样步骤重复萃取一次，合并两次萃取液，用 2.5 mol/L NaOH 溶液调节 pH 至5.2。
猪尿样品：
准确吸取 5.0 mL 样品于50 mL 离心管中，用乙酸调节 pH 至 5.2后加入 20 mmol/L的 1 mL乙酸铵溶液（pH 5.2）。混均后加入10 mL乙酸乙酯与异丙醇混合溶剂（6:4），振荡混合2 min，静置分层，用滴管收集上层流动相；下层溶液中加入10 mL乙酸乙酯与异丙醇混合溶剂（6:4），振荡混合2 min，合并两次萃取液在 60 ℃ 水浴中旋转浓缩至干，加入 20 mmol/L的2 mL 乙酸铵溶液（pH 5.2），振荡溶解，作为备用液。
2. 净化
活化：依次用 5 mL 甲醇、5 mL 水和5 mL 30 mmol/L 盐酸润洗固相萃取柱
上样：将提取液加入柱中，弃去流出液。流速小于1 mL/min
淋洗：依次用5 mL水、5 mL甲醇淋洗，淋洗液弃去，并将小柱抽干
洗脱：6 mL 4% 氨化甲醇洗脱，收集洗脱液。流速小于1 mL/min
3. HPLC分析