Column:

Polar-Imidazole, 5 µm, 120 Å, 4.6 × 150 mm

Mobile phase:

ACN :10 mM NH₄Ac = 90 : 10 ( v/v )

Flow rate:

1.0 mL/min

Temperature:

Ambient

Detection:

UV 306 nm

Injection volume:

2 µL

Sample:

Methotrexate （MTX）
1.Methanol  （甲醇）              
2.MTX （氨甲喋呤）