产品介绍

Monomix IEX离子交换层析介质专为生物样品的分离纯化而设计。其以亲水性聚甲基丙烯酸酯为基质，粒径有15、30 & 60 μm三种规格，粒径分布更均一。其中Monomix MC填料孔径500 Å，为中等载量离子填料。Monomix HC孔径1000 Å，为高载量离子填料，动态载量大于80mg/ml。

Monomix IEX层析介质具有良好的物理化学稳定性，介质表面经赛分科技特殊处理，具有更好的亲水性，最大程度地避免了与生物类样品的非特异性吸附。并通过专有的表面修饰技术，在亲水性基质表面键合不同的离子交换官能团得到强阳离子交换（SP）、强阴离子交换（Q）、弱阴离子交换（DEAE）三种层析介质，并确保了表面离子交换层的高密度和均一性。Monomix IEX层析介质可广泛适用于抗体、疫苗、胰岛素、蛋白、核酸、肝素等生物样品的分离和纯化。

介质表面化学组成

 图1. Monomix HC/MC-SP、Q和DEAE介质的表面化学组成示意图

图2. Monomix MC30(粒径30μm)的电镜扫描图像。高度均一分散的介质具有很窄的颗粒分布(D90/D10<1.3)

图3. Monomix HC30(粒径30μm)的电镜扫描图像。

介质技术参数

表1. Monomix HC-IEX技术参数

表2. Monomix MC-IEX技术参数

^*动态载量（Dynamic Binding Capacity）测试方法：

Monomix HC/MC-Q：线性流速为180 cm/h，上样液为含2 mg/mL牛血清蛋白的50 mM Tris缓冲液（pH=8.5）。

Monomix HC/MC-DEAE：线性流速为180 cm/h，上样液为含2 mg/mL牛血清蛋白的20 mM Tris缓冲液（pH=8.0）。

Monomix HC/MC-SP：线性流速为360 cm/h，上样液为含1mg/mL溶菌酶的50 mM磷酸盐缓冲液(pH=6.0)。

 介质特性

& 高结合载量和极好的生物相容性

& 刚性基质可耐受高压和高流速

& 高分辨率、高柱效和高回收率

& 高批间重现性

& 易于放大

& 高度亲水性表面，可忽略的非特异性吸附

& 常规装柱条件下，体积变化小

& 产品供应能力: 〉100 L 

高动态载量

Monomix IEX层析介质以聚甲基丙烯酸酯微球为基质，在低驻留时间条件下仍然具有很高的动态结合载量。在实际使用过程中， 在同样的柱子尺寸和填料体积下，Monomix IEX可以缩减生物样品生产下游纯化的时间，提高生产效率；在同样的下游纯化的时间内，Monomix IEX可以装更长的柱子（填料体积大），可以批次处理更多的生物样品，从而提高生产效率。

图4. Monomix HC30/60-Q、DEAE和SP离子交换层析介质动态载量和驻留时间关系

a）HC30/60-Q

填料: Monomix HC-Q (30&60μm, 1000Å)

柱尺寸: 4.6 mm ID × 50 mm (不锈钢)

流动相: 含2 mg/mL牛血清蛋白的50 mM Tris缓冲液(pH8.5)

流速: 0.5 mL/min (180 cm/h)

检测器：280 nm 检测温度：室温

b）HC30/60-DEAE

填料: Monomix HC-DEAE (30&60μm, 1000Å)

柱尺寸: 4.6 mm ID × 50 mm (不锈钢)

流动相: 含2 mg/mL牛血清蛋白的20 mM Tris缓冲液(pH8.0)

流速: 0.5 mL/min (180 cm/h)

检测器：280 nm 检测温度：室温

c）HC30/60-SP

填料: Monomix HC30-SP & Monomix HC60-SP (30&60μm, 1000Å)

柱尺寸: 4.6 mm ID × 50 mm (不锈钢)

流动相: 含1 mg/mL溶菌酶的50 mM 磷酸盐缓冲液(pH 6.0)

流速: 1.0 mL/min (360 cm/h)

检测器：280 nm 检测温度：室温

更快的操作流速

相比于传统的琼脂糖基质，采用聚甲基丙烯酸酯基质可以提高填料的耐压性能，能够在更快的流速下实现样品纯化，（或者可以装更长的柱子，可以批次处理更多的生物样品）节省宝贵的时间，提高生产效率。对于不稳定的生物样品（要求快速分离纯化母液），在提高生产效率的同时可以同时提高产品的收率和质量控制。

图5. Monomix IEX填料背压与流速的线性关系。由于表面结构的不同，在相同流速下，MC介质能显示出更低的背压

柱尺寸: 10 mm ID × 150 mm (不锈钢)

流动相：Monomix HC/MC-Q：50 mM Tris缓冲液(pH 8.0)

                Monomix HC/MC-SP：20 mM磷酸盐缓冲液(pH 7.0)

超高的耐碱性能

Monomix IEX 层析介质可在pH2-12之间正常使用，对在线清洗的1.0 M NaOH也显示出良好的耐碱性。如图6所示，以1200个柱体积的1.0 M NaOH进行在线清洗，溶菌酶(Lysozyme)保留时间的变化可以忽略不计。

图6. Monomix IEX层析介质耐1.0 M NaOH CIP性能

填料: Monomix HC30-SP (30μm, 1000Å)

柱尺寸: 4.6 mm ID × 50 mm (不锈钢)

流动相: A: 20 mM磷酸盐缓冲液(pH 6.0)

              B: A+1.0 M NaCl

梯度：0-75%B in 10min 

流速: 0.4 mL/min (144 cm/h)

样品: 1mg/mL溶菌酶(Lysozyme)

在线清洗: 1.0 M NaOH

可忽略的非特异性吸附

Monomix IEX表面含有多个亲水结构域，当用来进行生物分析时，能使其非特异性吸附最小化。如图7和图8所示，无论是Monomix HC30-Q还是SP都对样品（溶菌酶和牛血清蛋白）显示出最小的非特异性吸附。

图7. 在Monomix HC30-SP层析柱连续进样牛血清蛋白(BSA)样品18次

填料: Monomix HC30-SP (30μm, 1000Å)

柱尺寸: 4.6 mm ID × 50 mm (不锈钢)

流动相: 20 mM磷酸盐缓冲液+0.3 M NaCl，pH 7.0

流速: 0.5 mL/min (180 cm/h)

样品: 1mg/mL牛血清蛋白(BSA)

进样量: 5 μL

图8. 在Monomix HC30-Q层析柱连续进样溶菌酶(Lysozyme)样品18次

填料:Monomix HC30-Q (30μm, 1000Å)

柱尺寸: 4.6 mm ID × 50 mm (不锈钢)

流动相: 20 mM磷酸盐缓冲液+0.3 M NaCl，pH 7.0

流速: 0.5 mL/min (180 cm/h)

样品: 0.5mg/mL溶菌酶(Lysozyme)

进样量: 5 μL

高批间重现性

Monomix IEX通过严格控制的程序进行生产，因此具有较高的批间重现性。

图9.Monomix HC30-SP的批间重现性测试

填料:Monomix HC30-SP (30μm, 1000Å)

柱尺寸: 4.6 mm ID × 50 mm (不锈钢)

流动相: A: 20 mM磷酸盐缓冲液(pH 6.0)

              B: A+1.0 M NaCl

流速: 1.0 mL/min (360 cm/h)

梯度: 0-75%B in 25min

样品: 1）核糖核酸酶A 2)细胞色素C 3）溶菌酶（1mg/mL）

进样量:20 μL

图10. Monomix HC30-Q的批间重现性测试

填料:Monomix HC30-Q (30μm, 1000Å)

柱尺寸: 4.6 mm ID × 50 mm (不锈钢)

流动相: A: 50 mM Tris缓冲液(pH 8.5)

              B: A+0.5 M NaCl

流速: 1.0 mL/min (360 cm/h)

梯度: 0-75%B in 25min

样品: 1）卵清蛋白 2)胰蛋白酶抑制剂（1mg/mL）

进样量:20 μL

易于放大生产

Monomix IEX层析介质具有易于放大生产的特性。如图11所示，在50x220 mm的柱上实现了三种蛋白质混合物的放大分离，同时具备高分离度和高效率（未显示分析柱的色谱图）。

图11. 从小规格分析柱到较大规格制备柱的放大生产

填料: Monomix HC30-SP (30μm, 1000Å)

柱尺寸: 50 mm ID × 220 mm FPLC

流动相: A: 20 mM磷酸盐缓冲液(pH 6.0)

              B: A+1.0 M NaCl

梯度: 20%-100%B in 90mi

流速: 20mL/min (61 cm/h)

进样量: 4 mL

样品: 1）核糖核酸酶A（5mg） 2)细胞色素C（5mg） 3）溶菌酶（10mg）

单克隆抗体纯化应用

1) Monomix HC15-SP 

图12a. Monomix HC15-SP填料分离纯化单抗样品

填料: Monomix HC15-SP (30μm, 1000Å)

柱尺寸: 25 mm ID × 250 mm FPLC

流动相: A: 10 mM 磷酸盐缓冲液(pH8.0)

B: A+100 mM NaCl (pH8.0)

流速: 12.0 mL/min 检测器: UV 280 nm

样品: 某单抗（2.4mg/mL）进样量: 0.2 mg mAb/mL resin

图12b. Monomix HC15-SP填料分离纯化单抗样品的效果

分析柱: Antibodix WCX-NP5 (5 µm, 4.6 x 250 mm)

流动相: A: 20 mM 磷酸盐缓冲液 + 50 mM NaCl, pH 6.5

              B: 20 mM 磷酸盐缓冲液 + 90 mM NaCl, pH 6.5

流速: 0.8 mL/min 检测器: UV 280 nm

样品: 浓缩后的样品 进样量: 100 µL

2) Monomix MC30-SP

图13a. Monomix MC30-SP填料分离纯化单抗样品

填料: Monomix MC30-SP (30μm, 500Å)

柱尺寸: 6.6 mm ID × 30 mm FPLC

流动相: A: 50 mM醋酸钠缓冲液(pH5.3)

              B: A+1.0 M NaCl (pH5.3)

流速: 1 mL/min 进样量: 3 mL

样品: 某单抗收集液（11.55mg/mL）

分析柱: Zenix SEC-300 (3 μm,300 Å, 4.6×300 mm)

流动相: 150 mM 磷酸盐 (pH 7.0)

流速: 0.35mL/min 检测器: UV 280 nm

样品: 洗脱液            进样量: 2 μL

3) Monomix HC30-SP

图14a. Monomix HC30-SP填料分离纯化单抗样品

填料: Monomix HC30-SP (30μm, 1000Å)

柱尺寸: 6.6 mm ID×30 mm FPLC

流动相: A: 50 mM醋酸钠缓冲液(pH5.3)

              B: A+1.0 M NaCl (pH5.3)

流速: 1 mL/min       进样量: 3 mL

样品: 某单抗收集液（11.55mg/mL）

图14b. Monomix HC30-SP填料分离纯化单抗样品的效果

分析柱: Zenix SEC-300 (3 μm,300 Å, 4.6×300 mm)

流动相: 150 mM 磷酸盐 (pH 7.0)

流速: 0.35mL/min     检测器: UV 280 nm

样品: 洗脱液               进样量: 2 μL

4) Monomix MC30-DEAE

图15a. Monomix MC30-DEAE填料分离纯化单抗样品

填料: Monomix MC30-DEAE (30μm, 500Å)

柱尺寸: 6.6 mm ID×150 mm FPLC

流动相: A: 20 mM磷酸盐缓冲液(pH7.0)

              B: A+0.5 M NaCl (pH7.0)

流速: 1.0 mL/min      进样量: 3 mL

样品: 某抗体样品（50.9mg/mL）

图15b. 图15a所示纯化中收集组分的SDS-PAGE分析

其中粗品进样量：30mg抗体/mL resin，SDS-PAGE进样量：粗品 25μg

包装规格为0.5, 1, 5, 10, 100L，预装柱规格为1,5mL，也可根据客户的需要提供其它规格的产品和预装柱。