产品介绍
Monomix MC-HIC填料以亲水性聚甲基丙烯酸酯为基质,粒径为30 和60 μm,粒径更均一,孔径1000 Å,具有良好的物理化学稳定性。Monomix MC-HIC填料表面经赛分科技特殊处理,具有更好的亲水性,最大程度地避免了与生物类样品的非特异性吸附。相比赛分科技其他两款疏水填料Polar MC-HIC及Generik MC-HIC,Monomix MC-HIC的孔径更大,更适用于有较大分子量的蛋白。
填料结构
Monomix MC-HIC填料表面覆盖了一层亲水性的纳米薄层,再通过化学修饰键合上不同官能团,如Butyl(丁基)、 Ether(乙醚基)和芳香基(如苯基),如图1。不同的基团提供不同的疏水性能,疏水性由弱至强为-Ether、-Butyl、Phenyl。
图1. Monomix MC-HIC的 Ether (A), Butyl (B) and Phenyl (C)结构
技术参数
填料类型
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Monomix MC-HIC Ether
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Monomix MC-HIC Butyl
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Monomix MC-HIC Phenyl
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基质
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亲水性聚甲基丙烯酸酯
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粒径大小
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30 μm
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60 μm
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30 μm
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60 μm
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30 μm
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60 μm
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孔径大小
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1000 Å
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动态载量*
(mg 溶菌酶/mL填料)
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>20
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>10
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>40
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>20
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>45
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>30
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pH适用范围
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2-13
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最高操作温度
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40 ºC
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最大操作压力
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1 MPa (10 bar)
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流动相兼容性
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一般水溶液兼容,也可兼容于水和乙腈、丙酮或甲醇的混合液。常用缓冲液体系: Tris、磷酸盐、醋酸盐缓冲液等
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最大线性流速
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1800 cm/h
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保存
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50%(v/v)匀浆保存于20%乙醇中
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*DBC 测试方法:1 mg/mL溶菌酶(lysozyme)溶于25 mM磷酸盐缓冲液(pH 7) + 2 M (NH4)2SO4,线性流速360 cm/h,检测波长280 nm,载量以10%流穿计。
填料特性
高的机械稳定性保证了填料能最大耐受10 bar的压力,在工业纯化工艺开发中可以满足高流速和减少操作时间的要求。高的化学稳定性保证填料能耐受pH 14的清洗操作。这些优异的填料性能使其满足从实验室工艺开发、工艺放大到完成生产等各阶段的分离纯化需求
更快的操作流速
相比于传统的琼脂糖基质,采用聚甲基丙烯酸酯基质可以提高填料的耐压性能,能够在更快的流速下实现样品纯化(或者可以装更长的柱子,可以批次处理更多的生物样品),节省宝贵时间,提高生产效率。对于不稳定的生物样品(要求快速分离纯化母液),在提高生产效率的同时可以提高产品的收率和质量控制。
不同官能团的选择性比较
图5. Monomix MC-HIC填料不同官能团分析性能的比较
流动相: A: 25 mM Na-Phosphate + 2 M (NH4)2SO4, pH 7.0,
B: 25 mM Na-Phosphate pH 7.0
梯度: 0-30 min 0-100%B, 30-45 min 100%B
流速: 1.5 mL/min 检测器: 214 nm 柱温: 25 ℃
进样量: 20 mL 样品: 核糖核酸酶A、溶菌酶、胰凝乳蛋白酶原(2 mg/mL)
单克隆抗体纯化应用
1) Monomix MC30-HIC Butyl
图6a. Monomix MC30-HIC Butyl填料纯化单抗样品
层析柱: 6.6 mm*30 mm FPLC
样品:11 mL某单抗洗脱混合液,2.59 m g/mL
流动相:A: 1 M (NH4)2SO4, 0.1M NaH2PO4 ( pH 7.0 ),
B: 0.1M NaH2PO4 ( pH 7.0 )
流速:1 mL/min 检测器:280 nm
图6b. Monomix MC30-HIC Butyl填料纯化单抗样品的效果
色谱柱:Zenix SEC-300 (4.6×300 mm)
流动相:150 mM Na-phosphate,pH 7.0 流速:0.35 mL/min
进样体积:20 mL 检测器:280 nm
图6c. Monomix MC30-HIC Butyl填料纯化IgG4样品
层析柱: 6.6 mm*30 mm FPLC
样品:200 mL某IgG4原液,75 m g/mL
流动相:A: 2 M (NH4)2SO4, 0.1M NaH2PO4 ( pH 7.0 ),
B: 0.1M NaH2PO4 ( pH 7.0 )
流速:1 mL/min 检测器:280 nm
图6d. Monomix MC30-HIC Butyl填料纯化IgG4样品的效果
色谱柱:Zenix SEC-300 (4.6×300 mm)
流动相:150 mM Na-phosphate,pH 7.0 流速:0.35 mL/min
进样体积:20 mL 检测器:280 nm
2) Monomix MC30-HIC Phenyl
图7a. Monomix MC30-HIC Phenyl填料纯化单抗样品
层析柱: 6.6 mm*30 mm FPLC
样品:4 mL某单抗洗脱混合液,8.89 m g/mL
流动相:A: 1 M (NH4)2SO4, 0.1M NaH2PO4 ( pH 7.0 ),
B : 0.1M NaH2PO4 ( pH 7.0 )
流速:1 mL/min 检测器:280 nm
图7b. Monomix MC30-HIC Phenyl填料纯化单抗样品的效果
色谱柱:Zenix SEC-300 (4.6×300 mm)
流动相:150 mM Na-phosphate,pH 7.0 流速:0.35 mL/min
进样体积:20 mL 检测器:280 nm
图7c. Monomix MC30-HIC Phenyl填料纯化IgG4样品
层析柱: 6.6 mm*30 mm FPLC
样品:200 mL某IgG4原液,75 m g/mL
流动相:A: 2 M (NH4)2SO4, 0.1M NaH2PO4 ( pH 7.0 ),
B: 0.1M NaH2PO4 ( pH 7.0 )
流速:1 mL/min 检测器:280 nm
图7d. Monomix MC30-HIC Phenyl填料纯化IgG4样品的效果
色谱柱:Zenix SEC-300 (4.6×300 mm)
流动相:150 mM Na-phosphate,pH 7.0 流速:0.35 mL/min
进样体积:20 mL 检测器:280 nm
产品系列
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产品名称
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官能团种类
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粒径/孔径
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订货号
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Monomix MC30-HIC
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Monomix MC30-HIC Ether
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乙醚基
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30μm,1000 Å
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281730950
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Monomix MC30-HIC Butyl
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丁基
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281630950
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Monomix MC30-HIC Phenyl
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苯基
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281930950
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Monomix MC60-HIC
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Monomix MC60-HIC Ether
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乙醚基
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60μm,1000 Å
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281760950
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Monomix MC60-HIC Butyl
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丁基
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281660950
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Monomix MC60-HIC Phenyl
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苯基
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281960950
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包装规格为0.5, 1, 5, 10, 100L,预装柱规格为1,5mL,也可根据客户的需要提供其它规格的产品和预装柱。