产品介绍

Monomix MC-HIC填料以亲水性聚甲基丙烯酸酯为基质，粒径为30 和60 μm，粒径更均一，孔径1000 Å，具有良好的物理化学稳定性。Monomix MC-HIC填料表面经赛分科技特殊处理，具有更好的亲水性，最大程度地避免了与生物类样品的非特异性吸附。相比赛分科技其他两款疏水填料Polar MC-HIC及Generik MC-HIC，Monomix MC-HIC的孔径更大，更适用于有较大分子量的蛋白。

填料结构

Monomix MC-HIC填料表面覆盖了一层亲水性的纳米薄层，再通过化学修饰键合上不同官能团，如Butyl（丁基）、 Ether（乙醚基）和芳香基（如苯基），如图1。不同的基团提供不同的疏水性能，疏水性由弱至强为-Ether、-Butyl、Phenyl。

图1. Monomix MC-HIC的 Ether (A), Butyl (B) and Phenyl (C)结构

技术参数

*DBC 测试方法：1 mg/mL溶菌酶(lysozyme)溶于25 mM磷酸盐缓冲液(pH 7) + 2 M (NH4)2SO4，线性流速360 cm/h，检测波长280 nm，载量以10%流穿计。

填料特性

高的机械稳定性保证了填料能最大耐受10 bar的压力，在工业纯化工艺开发中可以满足高流速和减少操作时间的要求。高的化学稳定性保证填料能耐受pH 14的清洗操作。这些优异的填料性能使其满足从实验室工艺开发、工艺放大到完成生产等各阶段的分离纯化需求

更快的操作流速

相比于传统的琼脂糖基质，采用聚甲基丙烯酸酯基质可以提高填料的耐压性能，能够在更快的流速下实现样品纯化（或者可以装更长的柱子，可以批次处理更多的生物样品），节省宝贵时间，提高生产效率。对于不稳定的生物样品（要求快速分离纯化母液），在提高生产效率的同时可以提高产品的收率和质量控制。

不同官能团的选择性比较

图5. Monomix MC-HIC填料不同官能团分析性能的比较

流动相: A: 25 mM Na-Phosphate + 2 M (NH4)2SO4, pH 7.0,

              B: 25 mM Na-Phosphate pH 7.0

梯度: 0-30 min 0-100%B, 30-45 min 100%B

流速: 1.5 mL/min 检测器: 214 nm 柱温: 25 ℃

进样量: 20 mL 样品: 核糖核酸酶A、溶菌酶、胰凝乳蛋白酶原(2 mg/mL)

 单克隆抗体纯化应用

1） Monomix MC30-HIC Butyl

图6a. Monomix MC30-HIC Butyl填料纯化单抗样品

层析柱: 6.6 mm*30 mm FPLC

样品：11 mL某单抗洗脱混合液，2.59 m g/mL

流动相：A: 1 M (NH4)2SO4, 0.1M NaH2PO4 ( pH 7.0 ),

                B: 0.1M NaH2PO4 ( pH 7.0 )

流速：1 mL/min 检测器：280 nm

图6b. Monomix MC30-HIC Butyl填料纯化单抗样品的效果

色谱柱：Zenix SEC-300 (4.6×300 mm)

流动相：150 mM Na-phosphate，pH 7.0 流速：0.35 mL/min

进样体积：20 mL 检测器：280 nm

图6c. Monomix MC30-HIC Butyl填料纯化IgG4样品

层析柱: 6.6 mm*30 mm FPLC

样品：200 mL某IgG4原液，75 m g/mL

流动相：A: 2 M (NH4)2SO4, 0.1M NaH2PO4 ( pH 7.0 ),

                B: 0.1M NaH2PO4 ( pH 7.0 )

流速：1 mL/min 检测器：280 nm

图6d. Monomix MC30-HIC Butyl填料纯化IgG4样品的效果

色谱柱：Zenix SEC-300 (4.6×300 mm)

流动相：150 mM Na-phosphate，pH 7.0 流速：0.35 mL/min

进样体积：20 mL 检测器：280 nm

2） Monomix MC30-HIC Phenyl

图7a. Monomix MC30-HIC Phenyl填料纯化单抗样品

层析柱: 6.6 mm*30 mm FPLC

样品：4 mL某单抗洗脱混合液，8.89 m g/mL

流动相：A: 1 M (NH4)2SO4, 0.1M NaH2PO4 ( pH 7.0 ),

                B : 0.1M NaH2PO4 ( pH 7.0 )

流速：1 mL/min     检测器：280 nm

图7b. Monomix MC30-HIC Phenyl填料纯化单抗样品的效果

色谱柱：Zenix SEC-300 (4.6×300 mm)

流动相：150 mM Na-phosphate，pH 7.0 流速：0.35 mL/min

进样体积：20 mL        检测器：280 nm

图7c. Monomix MC30-HIC Phenyl填料纯化IgG4样品

层析柱: 6.6 mm*30 mm FPLC

样品：200 mL某IgG4原液，75 m g/mL

流动相：A: 2 M (NH4)2SO4, 0.1M NaH2PO4 ( pH 7.0 ),

                B: 0.1M NaH2PO4 ( pH 7.0 )

流速：1 mL/min         检测器：280 nm

图7d. Monomix MC30-HIC Phenyl填料纯化IgG4样品的效果

色谱柱：Zenix SEC-300 (4.6×300 mm)

流动相：150 mM Na-phosphate，pH 7.0 流速：0.35 mL/min

进样体积：20 mL    检测器：280 nm