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Glycomix™ SAX结构示意图
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Glycomix™ SAX离子交换色谱柱专为带多电荷聚糖类化合物的分离而设计。填料基质为窄粒径分布的亲水聚合物颗粒,在聚合物颗粒的亲水表面化学键合强阴离子交换基团——季铵基。
Glycomix™ SAX 技术参数
特性 |
Glycomix™ SAX |
官能团
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季铵基
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表面特性
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亲水
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pH范围
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2 - 12
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4.6×250 mm柱的柱压
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0.22 mL/min为10 bar
1 mL/min为38 bar
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最大柱压
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~ 1,500 (psi)
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盐浓度范围
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20 mM - 2.0 M
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最高温度
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~ 80 (°C)
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流动相兼容性
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水相和有机相
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应用
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肝素,带多电荷聚糖
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● 均匀一致的粒径确保了高分辨率和分离的高效性
● 高批间重现性
● 宽pH范围(2-12)
● 从分析级到制备级规模
● 适于肝素和聚糖的分离和分析
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高批间重现性
由于严格控制的表面化学和树脂生产工艺,Glycomix树脂具有高批间重现性,使得色谱柱性能非常稳定。在肝素钠的检测中,保留时间的批间分离偏差小于1%,峰面积则小于5%。
图1. 三个批次GlycomixTM SAX树脂的高批间重现性
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色谱条件 |
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Column: |
GlycomixTM SAX, 4.6×250mm |
Mobile phase: |
A: 0.04% NaH2PO4, pH 3.0
B: 0.04% NaH2PO4+14% NaClO4, pH 3.0 |
Flow rate: |
0.22 mL/min |
Gradient: |
20% - 90% B in 60 minutes |
Wavelength: |
202 nm |
Temperature: |
25 °C |
Injection volume: |
10 µL |
Pressure: |
9.5 bar |
Sample: |
20 mg/mL 肝素钠
1 mg/mL 硫酸皮肤素 (DS)
1 mg/mL 多硫酸软骨素 (OSCS) in H2O |
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批间的峰保留时间相对标准偏差
Peak Name |
Lot A |
Lot B |
Lot C |
RSD% |
Chondroitin Sulfate B |
12.286 |
12.300 |
12.434 |
0.41% |
Heparin |
21.71 |
21.723 |
21.919 |
0.44% |
OSCS |
33.936 |
33.853 |
34.114 |
0.32% |
色谱柱寿命长
先进的表面化学结构和稳定的生产工艺使得GlycomixTM SAX具有长的色谱柱寿命。下图显示了同一色谱柱在重复进样时的分离性能。该柱展现了稳定的分离效率。
图2. 重复进样的叠加图
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色谱条件 |
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Column: |
GlycomixTM SAX, 4.6×250mm |
Guard Column: |
GlycomixTM SAX, 4.6×50mm |
Mobile phase: |
A: 0.04% NaH2PO4, pH 3.0
B: 0.04% NaH2PO4+14% NaClO4, pH 3.0 |
Flow rate: |
0.22 mL/min |
Gradient: |
20% - 90% B in 60 minutes |
Wavelength: |
202 nm |
Temperature: |
25 °C |
Injection volume: |
10 µL |
Pressure: |
9.5 bar |
Sample: |
20 mg/mL肝素钠
1 mg/mL 硫酸皮肤素 (DS)
1 mg/mL多硫酸软骨素 (OSCS) in H2O |
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不同上样量下的灵敏分离
GlycomixTM SAX能够从标准品中分离出其他组分。在图3中,图A是20 mg/mL Heparin、1mg/mL DS和1 mg/mL OSCS的标准品色谱图,图B是浓度为1 mg/mL的OSCS色谱图。两图相对比可知,DS和肝素钠之间的小峰来自OSCS标准样品。色谱条件同图4。
GlycomixTM SAX可用于肝素钠及其杂质的定量分析。图4为不同上样量下的分离谱图,其中肝素钠浓度从0.5 mg/ml到10 mg/ml,OSCS的浓度从0.125 mg/ml到4 mg/ml,DS的浓度从0.25 mg/ml到4 mg/ml。在测试浓度范围内,相对偏差R2值超过0.99。
图3. OSCS标准品和肝素钠掺入DS与OSCS的色谱叠加图
图4. 不同肝素钠进样的色谱叠加图,其中肝素钠从0.5mg/mL到10mg/mL, DS从0.125 mg/m到4.0 mg/mL,OSCS从0.25 mg/mL到4.0 mg/mL
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色谱条件 |
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Column: |
GlycomixTM SAX, 4.6×250mm |
Guard Column: |
GlycomixTM SAX, 4.6×50mm |
Mobile phase: |
A: 0.04% NaH2PO4, pH 3.0
B: 0.04% NaH2PO4+14% NaClO4, pH 3.0 |
Flow rate: |
0.22 mL/min |
Gradient: |
20% - 90% B in 60 minutes |
Wavelength: |
202 nm |
Temperature: |
25 °C |
Injection volume: |
10 µL |
Pressure: |
10 bar |
Sample: |
20 mg/mL 肝素钠
0.2 mg/mL 硫酸皮肤素(DS)
0.2 mg/mL 多硫酸软骨素 (OSCS) |
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图5. 硫酸皮肤素(DS)、肝素钠和多硫酸软骨素(OSCS)的校准曲线
色谱柱性能比较
经比较, 在肝素钠的分离上,GlycomixTM SAX优于D品牌的柱子。下图是用GlycomixTM SAX分离肝素钠的色谱图,硫酸皮肤素(DS)和肝素钠之间的分离度为3.8,肝素钠和多硫酸软骨素(OSCS)之间的分离度为5.8。美国药典(USP)对于DS/heparin和OSCS/heparin的分离度分别是1.0和1.5。GlycomixTM SAX的分离性能远远高于USP规定的要求。而D品牌色谱柱对于DS/hepari和heparin/OSCS的分离度分别为1.1和1.8。
图6. 肝素钠、硫酸皮肤素和多硫酸软骨素在GlycomixTM SAX上的分离
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色谱条件 |
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Column: |
GlycomixTM SAX, 4.6×250mm |
Guard Column: |
GlycomixTM SAX, 4.6×50mm |
Mobile phase: |
A: 0.04% NaH2PO4, pH 3.0
B: 0.04% NaH2PO4+14% NaClO4, pH 3.0 |
Flow rate: |
0.22 mL/min |
Gradient: |
20% - 90% B in 60 minutes |
Wavelength: |
202 nm |
Temperature: |
25 °C |
Injection volume: |
10 µL |
Pressure: |
10 bar |
Sample: |
20 mg/mL 肝素钠
0.2 mg/mL 硫酸皮肤素(DS)
0.2 mg/mL 多硫酸软骨素 (OSCS) |
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产品
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ID × 长度 (mm)
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订货号
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Glycomix SAX
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4.6 × 250 mm
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901665-4625
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Glycomix SAX保护柱
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4.6 × 50 mm
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901665-4605
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Glycomix 方法包
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色谱柱 + 保护柱
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901665-KIT
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肝素钠(Heparin Sodium)
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50 mg
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HP-50
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硫酸皮肤素(Chondroitin Sulfate B)
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5 mg
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CS-5
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多硫酸软骨素(Oversulfated Chondroitin Sulfate)
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5 mg
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OSCS-5
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注:以上为常备规格订货信息,其它规格或特殊定制产品,电询。
产品手册
使用说明书
Glycomix离子交换色谱柱使用说明书(English)